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你知道沃特世色譜柱異常的解決辦法嗎

更新更新時(shí)間:2022-03-09

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  沃特世色譜柱在使用前,最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
 
  沃特世色譜柱異常解決辦法:
 
  柱壓與硅膠基質(zhì)的形態(tài)(如無(wú)定形或球形硅膠)、顆粒大小、填料合成條件、裝柱條件、所用流動(dòng)相和分析時(shí)的溫度有關(guān)。不同廠家的色譜柱柱壓會(huì)有所差別,相同流動(dòng)相和溫度的條件下,不同廠家的新色譜柱有的柱壓可能相差4、5個(gè)MPa,特別是低端和色譜柱之間,這一區(qū)別比較明顯。這是由色譜柱廠家所選用的硅膠基質(zhì)及其生產(chǎn)條件決定的,這種差異的存在是正常的。同時(shí)需要說(shuō)明的一點(diǎn)是,柱壓與柱效有一定的關(guān)系,通常柱效高的色譜柱柱壓相對(duì)而言會(huì)高一點(diǎn),但柱壓高的色譜柱并不一定就具有高柱效。
 
  在沃特世色譜柱的使用過程中柱壓通常會(huì)出現(xiàn)兩種升高的形式:
 
  1、隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)色譜柱柱壓慢慢上升,這是正常的;
 
  2、使用過程中(流動(dòng)相和溫度沒有改變的條件下)色譜柱壓力突然升高很多。這種壓力突然升高的現(xiàn)象,通常是由工作人員操作不當(dāng)引起的。
 
  原因:
 
  1、樣品太臟,使用前沒有過濾,導(dǎo)致柱篩板堵塞;
 
  2、樣品含有的雜質(zhì)在流動(dòng)相中的溶解性不是很好,與流動(dòng)相混合后析出,導(dǎo)致柱塞板堵塞;
 
  3、使用緩沖鹽,處理錯(cuò)誤,緩沖鹽在色譜柱中析出,堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙。
 
  解決辦法對(duì)于第二種,即柱壓突然升高的情況,通常有以下幾種解決辦法:
 
  1、將色譜柱反接,用含水比例較大的流動(dòng)相進(jìn)行沖洗。
 
  2、色譜柱進(jìn)樣一端的篩板取下,分別放在水中和甲醇中超聲或更換新的柱篩板。如果柱效沒變,但柱壓仍然較高,則應(yīng)考慮進(jìn)樣端填料受污染的問題,因此除了取下進(jìn)樣端篩板超聲外,還需要挖掉進(jìn)樣端的部分填料,挖去填料之前先檢查一下填料的顏色,如果填料的顏色發(fā)生了變化,則應(yīng)該挖掉直到見到白色的填料為止。
 
  挖掉后色譜柱將出現(xiàn)一個(gè)缺口,填補(bǔ)缺口的填料可以從另一支相同品牌、相同型號(hào)的報(bào)廢色譜柱的出口端獲得,填料用有機(jī)溶劑如甲醇等調(diào)成糊狀裝入缺口處,壓緊刮平,再裝上篩板。

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